МУК 4.1.914-99

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по измерению концентраций 2-(4-метил-1-пиперазинил)-10-метил-3,4-
диазофенаксазина дигидрохлорида дигидрат (aзaфенa) в воздухе рабочей зоны
 методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

     
Дата введения: с момента утверждения

     УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 30.12.1999 г.
     
     

М.м. 388,3

     Азафен (2-(4-метил-1-пиперазинил)-10-метил-3,4-диазофенаксазина дигидрохлорида дигидрат) - кристаллическое вещество светло-желтого или светло-зеленого цвета. Растворим в воде. Нерастворим в спиртах, хлороформе, эфире.  310-315 °С.
     
     В воздухе находится в виде аэрозоля.
     
     Обладает общетоксическим действием.
     
     ОБУВ в воздухе 0,4 мг/м.
     
     

Характеристика метода

     
     Методика основана на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением  УФ-детектора.
     
     Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.
     
     Нижний предел измерения азафена в хроматографируемом объеме (50 мкл) 0,05 мкг.
     
     Нижний предел измерения концентрации азафена в воздухе 0,2 мг/м (при отборе 25 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций азафена в воздухе от 0,2 до 4 мг/м.
     
     Определению не мешает присутствие пикалина и диазафеноксазина.
     
     Суммарная погрешность измерения не превышает ±19,57%.
     
     Время выполнения измерения, включая отбор пробы, около 40 минут.
     
     

Приборы, аппаратура, посуда

     
     Микроколоночный жидкостной хроматограф "Милихром" или другие модели с УФ-детектором.
     
     Хроматографическая колонка длиной 100 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом "Силасорб С" с размером зерен 7,0 мкм.
     
     Стеклянная ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5, ТУ 25-1173.131-85 (или другая такого же типа). Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2х2х0,2 мм).
     
     Весы аналитические ВЛР-200, ГОСТ 19491-74, или другие того же класса.
     
     Электроаспиратор ЭА-1, ОСТ 95.10052-84
     
     Фильтродержатель, ТУ 95.7205-77
     
     Микроскоп отсчетный типа МПБ-2, ТУ 3-3.824-76
     
     Колбы мерные, вместимостью 100 мл, ГОСТ 1770-74
     
     Пипетки мерные, вместимостью 5 мл, ГОСТ 20292-74*
________________
     * Действуют ГОСТ 29169-91, ГОСТ 29227-91-ГОСТ 29229-91, ГОСТ 29251-91-ГОСТ 29253-91. - Примечание изготовителя базы данных.
          
     Градуированные пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл, ГОСТ 10515-75
     
     

Реактивы, растворы, материалы

     
      Азафен, ФС 42-1613-81, 99% чистоты
     
     Калий марганцевокислый (калий перманганат), ТУ 20490-75
     
     Ацетонитрил очищенный
     
     Ацетонитрил очищенный получают из ацетонитрила, ТУ 6-09-3534-82, путем ректификации с предварительной химической обработкой, которая заключается в кипячении растворителя с обратным холодильником в присутствии перманганата калия из расчета 1 г перманганата калия на 1 л растворителя. Кипячение проводится до полного перехода перманганата калия в двуокись марганца. Перед ректификацией осадок двуокиси марганца отделяют путем фильтрации через фильтр Шотта N 4. Ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2х2х0,2 мм). Основную фракцию отбирают при температуре 81,6 °С (атмосферное давление) в пределах колебаний ±0,1 °С.
     
     Натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный, NaHPOx12HO (динатрийфосфат), TУ 4172-76
     
     Калий фосфорнокислый однозамещенный, KHPO (калий дифосфат),  ТУ 4198-75
     
     0,067 М раствор динатрийфосфата готовят растворением 23,877 г натрия фосфорнокислого двузамещенного 12-водного в воде в мерной колбе вместимостью 1 л.
     
     0,067 М раствор калийдифосфата готовят растворением 9,078 г калия фосфорнокислого однозамещенного в воде в мерной колбе вместимостью 1 л.
     
     0,067 М фосфатный буфер (рН 7,8) готовят смешивая 915 мл  0,067 М раствора динатрийфосфата и 85 мл 0,067 М раствор калийдифосфата.
     
     0,005 М фосфатный буфер (рН 7,8) готовят соответствующим разбавлением 0,067 М фосфатного буфера водой.
     
     Фосфатный буфер устойчив при хранении в холодильнике в течение месяца.
     
     Элюент: ацетонитрил - 0,005 М фосфатный буфер (рН 7,8), 5:1
     
     Стандартный раствор N 1 с концентрацией азафена 500 мкг/мл готовят растворением 0,05 г вещества в элюенте в мерной колбе вместимостью 100 мл.
     
     Стандартный раствор N 2 с концентрацией азафена 25 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 элюентом.
     
     Растворы используют в день приготовления.
     
     Фильтры аналитические стекловолокнистые, ТУ 8-ЮП-1-77
     
     

Отбор пробы воздуха

     
     Воздух с объемным расходом 5 л/мин аспирируют через аналитический стекловолокнистый фильтр. Для определения 0,5ОБУВ достаточно отобрать 25 л воздуха.
     
     Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца.
     
     

Подготовка к измерению

     
     Хроматографическая колонка промышленного изготовления.
     
     Инжектируют в хроматограф от 0,050 до 1 мкг азафена.
          
     Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:
     

     
     На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочный график, выражающий зависимость площади пиков (мм) от содержания азафена в хроматографируемом объеме пробы (мкг).
     
     Построение градуировочных графиков необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого инжектируемого объема. Проверку градуировочных графиков следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

     
     Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 5 мл элюента и оставляют на 15 мин при комнатной температуре и периодическом помешивании. Степень десорбции с фильтра 97,5%.
     
     Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика.
     
     Количественное определение содержания азафена в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
     
     

Расчет концентрации

     
     Концентрация азафена "" в воздухе (в мг/м) вычисляют по формуле:
     

,

     
где - содержание азафена в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;
             
      - объем пробы, взятой на хроматографирование, мкл;
           
      - общий объем анализируемого раствора, мкл;
             
      - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).